|
|
|
Ноябрь 2017, № 12 (212), стр. 84–89doi: 10.25198/1814-6457-212-84
УДК: 579.24Васильченко А.С., Валышев А.В. ОПТИМИЗАЦИЯ СОСТАВА ПИТАТЕЛЬНОЙ СРЕДЫ МИКРООРГАНИЗМОВ КАК ПОДХОД К ВЫДЕЛЕНИЮ БАКТЕРИОЦИНОВ Антимикробные пептиды бактериального происхождения можно рассматривать как эффективные пищевые консерванты, а также терапевтические средства. Первые трудности в изучении этих веществ начинаются на стадии изоляции бактериоцина от культурной среды производителя микроорганизма. Представлен простой и доступный подход к оптимизации изоляции бактериоцинов от метаболитов микроорганизмов. В этом исследовании штамм E. faecium ICIS 7 был использован в качестве производителя бактериоцина. Бактерии культивировались на четырех различных средах, состоящих из двух коммерческих сред и двух полусинтетических. Выделение бактериоцинов проводили обращенно-фазовой жидкостной высокоэффективной хроматографии. На первом этапе были оценены параметры роста бактерий в различных средах и полуколичественная оценка производства бактериоцина. На втором этапе получены и сопоставлены хроматографические профили. Наконец, было показано, что использование простой среды, состоящей только из экстракта дрожжей, позволяет производить бактериоцины и впоследствии упростить их хроматографическую очистку. Таким образом, можно сделать вывод, что экстракт дрожжей является ингредиентом, доступным большинству лабораторий, в то время как компоненты для приготовления химически определенной среды по-прежнему являются достаточно дорогостоящими химическими реагентами (аминокислоты, нуклеиновые кислоты и др.).). Применение дрожжевого экстракта для выращивания и производства бактериоцинов значительно снижает затраты на изоляцию целевого полипептида.Ключевые слова: бактериоцины, минимальная среда, энтерококки.
Список использованной литературы:
1. Ventola C.L. The Antibiotic Resistance Crisis: Part 1: Causes and Threats // Pharmacy and Therapeutics. — 2015, — V.40 — N 4, pp. 277-283.
2. Brogden K. Antimicrobial peptides: pore formers or metabolic inhibitors in bacteria? // Nat Rev Microbiol. — 2005, –V.3, — pp. 238–50.
3. Cytryńska M., Zdybicka-Barabas A. Defense peptides: recent developments // Biomol Concepts, — V. 6, N.4 pp. 237-51.
4. Wang G., Li X., Wang Z. APD3: the antimicrobial peptide database as a tool for research and education // Nucleic Acids Research, — 2016, — V.44, — pp. D1087-D1093.
5. Korneva E.A., Kokryakov V.N. Defensins: Antimicrobial peptides with a broad spectrum of biological activity // NeuroImmune Biology — 2007, — V. 3, — pp.451–462.
6. Cheigh C.I., Kook M.C., Kim S.B., Hong Y.H., Pyun Y.R. Simple one-step purification of nisin Z from uncalrified culture broth of Lactococcus lactis subsp. lactis A164 using expanded bed ion exchange chromatography // Biotechnol Lett — 2004 — V.26, pp. 1341–1345.
7. Li C, Bai J, Cai Z, Ouyang F. (2002) Optimization of a cultural medium for bacteriocin production by Lactococcus lactis using response surface methodology. J Biotechnol: 93:27–34.
8. Garsa A.K., Kumariya R., Sood S.K. et al. Bacteriocin Production and Different Strategies for Their Recovery and Purification // Probiotics & Antimicro Prot: — 2014, — V.6, — p. 47.
9. Fimland G., Sletten K., Nissen-Meyer J. The complete amino acid sequence of the pediocin-like antimicrobial peptide leucocin C // Biochem Biophys Res Commun, — 2002, — V. 295, — pp. 826–827.
10. Chumchalova J., Stiles J., Josephsen J., Plockova M. Characterization and purification of acidocin CH5, a bacteriocin produced by Lactobacillus acidophilus CH5. // J Appl Microbiol, — 2004, — V. 96, — pp.1082–1089.
11. Alfoldi L. La production induite de megacine en milieu synthetique // Ann Inst Pasteur, — 1957, — V. 94 — P. 474.
12. Pingitore V.E., Salvucci E., Sesma F., Nader-Macías M.E. Different strategies for purification of antimicrobial peptides from Lactic Acid Bacteria (LAB). Communicating Current Research and Educational Topics and Trends in Applied Microbiology A. Méndez-Vilas(Ed). 2007.
13. Medaglia G., Panke S. Development of a fermentation process based on a defined medium for the production of pregallidermin, a nontoxic precursor of the lantibiotic gallidermin // Appl Microbiol Biotechnol, — 2010, — V.87, — pp.145–157.
14. Pingitore E.V., Hebert E.M., Sesma F., Nader-Macias M.E. Influence of vitamins and osmolites on growth and bacteriocin production by Lactobacillus salivarius CRL 1328 in a chemically defined medium // Can J Microbiol. — 2009. — V. 55. — pp. 304–310.
15. Moretro T., Hagen B.F., Axelsson L. A new, completely defined medium for meat lactobacilli // J Appl Microbiol, — 2008, — V. 85, — pp.715–722.
16. Byappanahalli M.N., Nevers M.B., Korajkic A., Staley Z.R., Harwood V.J. Enterococci in the environment // Microbiol Mol Biol Rev, — 2012, — V. 76, — N4, — pp.685–706.
17. Yamamoto Y., Togawa Y., Shimosaka M., Okazaki M. Purification and Characterization of a Novel Bacteriocin Produced by Enterococcus faecalis Strain RJ-11 // Appl Environ Microbiol, — 2003, — V. 69, — pp. 5746-5753.
18. Vasilchenko A.S., Rogozhin E.A., Valyshev A.V. Purification of a novel bacteriocin-like inhibitory substance produced by Enterococcus faecium ICIS 8 and characterization of its mode of action // Microbial Drug Resistance. — 2016. — pp. 1-10. DOI: 10.1089/mdr.2016.0069.
19. Kuipers O.P., Beerthuyzenm M.M., de Ruyter P.G.G.A., Luesink E.J., de Vos W.M. Autoregulation of nisin biosynthesis in Lactococcus lactis by signal transduction // J Biol Chem, — 1995, — V.270, — pp.27299–304.
20. Ivanova I., Miteva V., Stefanova T., Pantev A., Budakov I., Danova S., Moncheva P., Nikolova I., Dousset X., Boyaval P. Characterization of a bacteriocin produced by Streptococcus thermophilus 81 // Int J Food Microbiol, — 1998, — V. 42, — pp.147–158.
21. Khan H., Flint S.H., Yu P.-L. Development of a chemically defined medium for the production of enterolysin A from Enterococcus faecalis B9510 // J Appl Microbiol, — 2013, V. 114, — pp.1092–1102.
О статье
Авторы: Васильченко А.С., Валышев А.В.
Год: 2017
doi: 10.25198/1814-6457-212-84
|
|
Главный редактор |
Сергей Александрович МИРОШНИКОВ |
|
|